អតិសុខុមទស្សន៍ fluorescent: គោលការណ៍នៃវិធីសាស្រ្តនេះ

ការស្រូបយកនិងការបំភាយទឹកឡើងវិញនិងសរីរាង្គបន្ថែមទៀតដពន្លឺគឺជាលទ្ធផលនៃ phosphorescence ឬលក្ខណះចំលងនេះ។ ភាពខុសគ្នារវាងបាតុភូតនេះគឺជារយៈពេលនៃការស្រូបនិងចន្លោះរវាងប្រែប្រួលភាយពន្លឺនេះ។ នៅពេលដែលលក្ខណះចំលងនៃដំណើរការទាំងនេះបានកើតមានឡើងស្ទើរតែក្នុងពេលដំណាលគ្នាខណៈពេលដែល phosphorescence - ការពន្យារពេលមួយចំនួន។

ប្រវត្តិសាស្រ្ត

នៅឆ្នាំ 1852 អ្នកវិទ្យាសាស្រ្តអង់គ្លេស Emma Stokes បានដំបូងបានរៀបរាប់លក្ខណះចំលង។ លោកបានណែនាំពាក្យថ្មីដែលជាលទ្ធផលនៃការពិសោធន៍ជាមួយនឹងការ fluorspar, ដែលបញ្ចេញពន្លឺក្រហមក្រោមពន្លឺ ultraviolet ។ Emma Stokes បានកត់សម្គាល់ឃើញថាជាបាតុភូតគួរឱ្យចាប់អារម្មណ៍។ វាត្រូវបានរកឃើញថារលកនៃវិទ្យុសកម្ម fluorescent នេះគឺតែងតែធំជាងលំហូរនៃពន្លឺការរំភើបចិត្តនោះទេ។

ដើម្បីបញ្ជាក់សម្មតិកម្មក្នុងសតវត្សទី 19 នេះមានការពិសោធន៍ជាច្រើន។ ពួកគេបានបង្ហាញថាភាពខុសគ្នានៃគំរូមួយ fluoresce ក្រោមឥទ្ធិពលនៃពន្លឺអ៊ុលត្រា UV បាន។ ក្នុងចំណោមសមា្ភារៈ, ក្នុងចំណោមរឿងផ្សេងទៀតគ្រីស្តាល់បាន, ជ័រ, ការជីកយករ៉ែ, chlorophyll ថ្នាំឆៅសមាសធាតុដ, វីតាមីន, ប្រេង។ ការប្រើប្រាស់ដោយផ្ទាល់ពីមាតថាំជីវបានចាប់ផ្តើមការធ្វើតេស្តសម្រាប់តែនៅឆ្នាំ 1930

អតិសុខុមទស្សន៍ fluorescent: បរិយាយ

មួយចំនួននៃការសមា្ភារៈដែលបានប្រើនៅក្នុងពាក់កណ្តាលទីមួយនៃសតវត្សរ៍ទី 20 ការសិក្សាខ្ពស់ពិសេសបានដាក់តាំងបង្ហាញ។ стал важнейшим инструментом и в биомедицинских, и в биологических исследованиях. សូមអរគុណចំពោះការសម្តែងដែលមិនអាចត្រូវបានសម្រេចដោយផ្ទុយវិធីសាស្រ្ត, វិធីសាស្រ្តនៃអតិសុខុមទស្សន៍លក្ខណះចំលងបានក្លាយទៅជាឧបករណ៍សំខាន់នៅក្នុងការស្រាវជ្រាវជីវឱសថនិងជីវសាស្រ្ត។ ស្មើភាពគ្នាទទួលបានលទ្ធផលសំខាន់និងសមា្ភារៈ។

? តើអ្វីទៅជាគុណសម្បត្តិធ្វើវិធីសាស្រ្តនៃអតិសុខុមទស្សន៍លក្ខណះចំលងនោះ? ការប្រើប្រាស់សម្ភារថ្មីមួយបានក្លាយទៅជាអាចធ្វើបាននិងការជ្រើសរើសនៃសមាសភាគ submicroscopic ក្រឡាជាក់លាក់ខ្ពស់។ អតិសុខុមទស្សន៍ fluorescent អាចរកឃើញម៉ូលេគុលតែមួយ។ ភាពខុសគ្នានៃការកំណត់អត្តសញ្ញាណអនុញ្ញាតឱ្យមួយដែលមាតថាំធាតុច្រើនដែលបានពីក្នុងពេលតែមួយ។ បើទោះបីជាការដោះស្រាយទំហំកំណត់នៃដែនកំណត់ប្រាក់ស្យុងនៃឧបករណ៍នេះដែលនៅក្នុងវេនអាស្រ័យលើលក្ខណៈសម្បត្តិជាក់លាក់នៃគំរូដែលបានកំណត់អត្តសញ្ញាណនៃម៉ូលេគុលនៅក្រោមកម្រិតនេះគឺជាការដែលអាចធ្វើបានណាស់។ គំរូជាច្រើនបន្ទាប់ពីការតាំងពិព័រណ៍ការ irradiation autofluorescence ។ បាតុភូតនេះត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយនៅក្នុង petrology រុក្ខសាស្ត្រឧស្សាហកម្មឧបករណ៍អេឡិចត្រូនិកនេះ។

លក្ខណៈពិសេស

សិក្សាជាលិកាសត្វឬធាតុបង្កជំងឺជាញឹកញាប់មានភាពស្មុគស្មាញឬខ្សោយពេកឬខ្លាំងណាស់ autofluorescence មិនច្បាស់លាស់។ ទោះជាយ៉ាងណា, តម្លៃនៅក្នុងការសិក្សាទទួលបាននូវសេចក្តីណែនាំទៅក្នុងសមាសភាគសម្ភារៈរំភើបនៅរលកជាក់លាក់មួយនិងបញ្ចេញអាំងតង់ស៊ីតេលំហូរពន្លឺចាំបាច់។ Fluorochromes ធ្វើជាថ្នាំដែលមានសមត្ថភាពឯករាជ្យបានភ្ជាប់ទៅនឹងរចនាសម្ព័ន្ធ (អាចមើលឃើញឬមើលមិនឃើញ) ។ ដូច្នេះពួកគេមានការជ្រើសរើសខ្ពស់ដើម្បីគោលដៅនិងទិន្នផល Quantum នេះ។

стала широко применяться с появлением естественных и синтетических красителей. អតិសុខុមទស្សន៍ fluorescent ត្រូវបានគេប្រើយ៉ាងទូលំទូលាយតាំងពីវត្តមាននៃថ្នាំធម្មជាតិនិងសំយោគនេះ។ ពួកគេមានទម្រង់មួយចំនួននៃការបំភាយអាំងតង់ស៊ីតេនិងការរំភើបចិត្តនិងការកំណត់គោលដៅដើម្បីគោលដៅជីវសាស្រ្តជាក់លាក់។

ការកំណត់អត្តសញ្ញាណនៃម៉ូលេគុលបុគ្គល

ជាញឹកញាប់នៅក្នុងលក្ខខណ្ឌល្អ, អ្នកអាចចុះឈ្មោះធាតុមួយដាច់ដោយឡែកបញ្ចេញពន្លឺ។ សម្រាប់ការនេះ, ក្នុងចំណោមរឿងផ្សេងទៀត, វាគឺជាការចាំបាច់ក្នុងការផ្តល់នូវសំលេងរំខានទាបគ្រប់គ្រាន់ដែលជាការចាប់និងផ្ទៃខាងក្រោយអុបទិក។ ម៉ូលេគុល Fluorescein ការបរាជ័យដោយសារតែការ photobleaching អាចបញ្ចេញ Photons ឡើងដល់ 300 ពាន់នាក់។ ។ នៅប្រសិទ្ធិភាពការប្រមូលផ្ដុំ 20% នៃដំណើរការនិងអាចចុះឈ្មោះពួកគេនៅក្នុងចំនួនទឹកប្រាក់ប្រហែល 60 ពាន់នាក់មួយ។

, основанная на лавинных фотодиодах или электронном умножении, позволяла исследователям наблюдать поведение отдельных молекул на протяжении секунд, а в ряде случаев и минут. អតិសុខុមទស្សន៍លក្ខណះចំលងដែលមានមូលដ្ឋានលើផ្ទាំងទឹកកកឬគុណ photodiode អេឡិចត្រូនិបានអនុញ្ញាតឱ្យក្រុមអ្នកស្រាវជ្រាវបានដើម្បីសង្កេតមើលឥរិយាបថរបស់ម៉ូលេគុលបុគ្គលតាមរយៈទីពីរ, និងក្នុងករណីខ្លះទោះបីនាទី។

ភាពស្មុគស្មាញ

គន្លឹះបញ្ហានៅក្នុងការពេញចិត្តនៃការបង្ក្រាបផ្ទៃខាងក្រោយសំលេងរំខានអុបទិក។ ដោយសារតែការពិតដែលថាមនុស្សជាច្រើនសម្ភារដែលត្រូវបានប្រើនៅក្នុងការរចនារបស់តម្រងនិងកញ្ចក់បង្ហាញ autofluorescence មួយចំនួន, ការខិតខំប្រឹងប្រែងរបស់អ្នកវិទ្យាសាស្ដ្រក្នុងដំណាក់កាលដំបូងត្រូវបានតម្រង់ទិសទៅរកការផលិតនៃសមាសភាគដែលមានលក្ខណះចំលងទាបនេះ។ ទោះជាយ៉ាងណា, ការពិសោធន៍ជាបន្តបន្ទាប់នាំឱ្យមានការសន្និដ្ឋានមានថ្មី។ , основанная на полном внутреннем отражении, позволяет достичь низкого фона и высокоинтенсивного возбуждающего светового потока. ជាពិសេសវាត្រូវបានគេរកឃើញថាអតិសុខុមទស្សន៍លក្ខណះចំលងដោយផ្អែកលើការឆ្លុះបញ្ចាំងខាងក្នុងសរុប, វាអនុញ្ញាតឱ្យផ្ទៃខាងក្រោយដើម្បីសម្រេចបាននូវអាំងតង់ស៊ីតេខ្ពស់ទាបនិងពន្លឺរំភើបចិត្ត។

យន្តការ

, основанной на полном внутреннем отражении, заключаются в использовании быстрозатухающей или нераспространяющейся волны. គោលការណ៍នៃអតិសុខុមទស្សន៍លក្ខណះចំលងដោយផ្អែកលើការឆ្លុះបញ្ចាំងខាងក្នុងសរុបគឺការប្រើប្រាស់នៃរលក evanescent ឬ evanescent នេះ។ វាបានកើតឡើងនៅព្រំដែនរវាងប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយដោយមានការខុសគ្នា សន្ទស្សន៍ចំណាំងបែរ។ ក្នុងករណីនេះ, ធ្នឹមពន្លឺដែលឆ្លងកាត់តាមរយៈព្រីសនេះ។ វាមានប៉ារ៉ាម៉ែត្រលិបិក្រមដំណើរងាកកាំរស្មីខ្ពស់។

ព្រីសដែលនៅជិតទៅនឹងដំណោះស្រាយ aqueous ឬកញ្ចក់ជាមួយនឹងប៉ារ៉ាម៉ែត្រទាប។ ប្រសិនបើធ្នឹមនៃពន្លឺដោយផ្ទាល់នៅវានៅមុំដែលជាការសំខាន់ច្រើនជាងមួយ, ធ្នឹមត្រូវបានឆ្លុះបញ្ចាំងទាំងស្រុងពីចំណុចប្រទាក់។ បាតុភូតនេះនៅក្នុងវេន, បណ្តាលរលក nonpropagating ។ នៅក្នុងពាក្យផ្សេងទៀតដែលបានបង្កើតអេឡិចត្រូវាលដែល penetrates ចូលទៅក្នុងមធ្យមជាមួយនឹងប៉ារ៉ាម៉ែត្រលិបិក្រមដំណើរងាកកាំរស្មីទាបមួយដើម្បីចម្ងាយតិចជាង 200 nanometers មួយ។

រលក evanescent អាំងតង់ស៊ីតេនៃពន្លឺដែល នឹងត្រូវបានគ្រប់គ្រាន់ដើម្បីរំភើប fluorophores ។ ទោះយ៉ាងណាដោយសារតែការជម្រៅតូចខ្លាំងណាស់របស់ខ្លួន, កម្រិតសំឡេងរបស់វានឹងត្រូវបានតូចណាស់។ លទ្ធផលគឺជាផ្ទៃខាងក្រោយកម្រិតទាប។

ការកែប្រែ

អតិសុខុមទស្សន៍ fluorescent ត្រូវបានផ្អែកលើការឆ្លុះបញ្ចាំងខាងក្នុងសរុប, អាចត្រូវបានអនុវត្តដោយមាន epi-ការបំភ្លឺ។ នេះតម្រូវឱ្យមានកញ្ចក់ជាមួយជំរៅលេខខ្ពស់ (យ៉ាងហោចណាស់ 1,4 នោះទេប៉ុន្តែវាគឺជាការចង់ដឹងថាវាបានឈានដល់ 1.45-1.6) និងផ្នែកខ្លះបរិធានវាលបំភ្លឺ។ ក្រោយមកទៀតត្រូវបានសម្រេចជាមួយនឹងទំហំតូចមួយកន្លែង។ សម្រាប់ឯកសណ្ឋានកាន់តែច្រើនដោយប្រើចិញ្ចៀនស្តើងដែលត្រូវបានរារាំងដោយផ្នែកនៃស្ទ្រីមនេះ។ ចំពោះមុំសំខាន់បន្ទាប់ពីមានការឆ្លុះបញ្ចាំងសរុប, យើងត្រូវការកម្រិតខ្ពស់នៃចំណាំងបែរនៃមធ្យមពន្លិចក្នុងការកញ្ចក់និងគ្របដណ្តប់នៃការកញ្ចក់មីក្រូទស្សន៍នេះ។